对大猪及能繁种猪进行免疫抗体监测可为控制疫病提供依据。猪前腔静脉采血具有采血量足、卫生,采血效果好的特点,采用这种采血方法能获得高质量的猪血清,可使免疫抗体监测信息更科学、准确。
1 针头
大猪和能繁母猪体形上的差异决定了前腔静脉采血时采血的深浅不同。一般大猪和能繁母猪都选用5~10 mL规格的一次性针筒采血,针头选择上的要求是:40 kg以上的大猪宜选用12 ×38 mm规格的针头,能繁母猪宜选用16×50 mm规格的针头。
2 保定
保定效果影响着采血的准确性和采血的效率,通常采用捕猪器或保定绳对猪进行保定。因大猪和能繁母猪生理情况不同,故保定物的选用上有所差别。
2.1 大猪保定 大猪采用站立式保定,由一名或两名助手用鼻捻或金属保定器栓住大猪上颌骨,然后收捻或拉紧保定器,并迅速施力往后上方牵引,让猪上颌骨稍微吊起,吊起程度以猪前肢刚好着地而无法踏实为度。保定时应将大猪两侧胸前窝(即肋骨与胸骨结合前侧方的陷窝)袒露,以便准确下针。吊起保定时,大猪的注意力集中在鼻部,呈退却姿势,可保持安定状态。
2.2 能繁母猪保定 能繁母猪同样采用站立式保定,由一名助手用保定绳将母猪上颌骨吊起后,向正前方用力牵引吊起至母猪前肢刚好着地,同时使母猪两侧胸前窝袒露,以便准确下针。保定时尽量将母猪上颌骨吊高,保持其头颈与水平面呈30°以上角。
3 采血
3.1 下针部位 猪的前腔静脉位于右侧第一肋骨前缘,是引导猪头、颈、前肢和大部分胸腔血液注入右心房的静脉干,其在胸腔前门,由左、右颈静脉和左右腋静脉汇合而成。
第一肋骨与胸骨柄结合处的前侧方的两个明显陷窝即为采血部位。因左侧陷窝过于靠近膈神经,所以多在右侧陷窝采血。采血前采血部位应进行常规消毒。
3.2 下针 猪的前腔静脉越往头部越浅、越细,越往胸部越深、越粗。
大猪和能繁母猪的血管较仔猪粗壮,根据这个特点,在对大猪和能繁母猪进行采血时,不能进针太深,要稍靠前,应选择颈部低凹处,最好在偏向气管约15°的方向下针。根据猪只大小,针头扎入深度一般为3~5 cm。
3.3 采血 大猪及能繁母猪的采血方式相同。采血下针后,拉紧针筒活塞,如果采血人员感觉手上有负压感且针筒内出现回血,则表明针头已扎入血管,随后轻轻抽动针筒活塞采取血液。
通常采血量在5 mL左右,采血完毕,拔出针头,用酒精棉球对采血部位进行按捺止血后,解除大猪或能繁母猪的保定。采血后清理采血场所并消毒,防止疫病传播。
如果在下针后不见血液流出,说明针头没有扎入血管,这可能是因前腔静脉较深造成的,此时,可用手紧顶针筒,以使针头扎深,若仍无法采血,可退后针头,左右轻轻晃动,待出现负压感及回血时再行采血。
3.4 血样保存 血液采集后立即推入试管中,防止血液凝结造成推出困难。血液推入试管时,要使针头紧贴管壁徐徐注入,试管不能振荡或血样不能产生气泡,以免因损害血细胞,造成溶血而难以分离出血清。完全推入血液后将试管倾斜放置,以便血清析出,然后在试管上做好标记,标明猪只耳牌号。最后将装有血液的试管置入离心机内,以4 000 r/min的转速运转15 min,血清分离成功后抽取1~2 mL,做好标记,在冷冻后送检。
4 注意事项
4.1 环境要求 采血场所要保持光线充足。夏季采血时室内温度最好控制在26~29 ℃,所采集的新鲜血液应及时用装有冰块的保温箱保存。冬季采血时室内温度最好控制在14~21 ℃,温度不宜过低或过高。
4.2 对猪的要求 为保证检测结果科学、精确,采血前应让猪停食8 h左右。
采血过程中,若猪出现呼吸困难、突然倒地等反应时,应立即停止采血,并通过注射地塞米松或肾上腺素等对猪进行急救。
4.3 送检要求 夏季血清应在常温下放置一段时间再送检,冬季血清应在24~36 ℃的温水中放置一段时间再送检。若要求送检抗凝全血,则应预先在针筒或试管内添加抗凝剂。若选用青霉素空瓶作血液、血清贮藏容器,则应用消毒液将空瓶洗净,再用清水冲洗后晒干备用。
5 小结
对大猪和能繁母猪进行前腔静脉采血要做好前期准备工作,包括选择针头、确定保定措施等。采血时下针要准确,并掌握好进针尺度,以确保快速有效地获取血液。采血后应做好血液保存工作,以确保血液质量。
掌握好猪前腔静脉采血技术能提高工作效率,获取准确、科学的抗体监测信息。■
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