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抗蛇毒血清的制备

  在介绍抗蛇毒血清制备时,我们先认识一下什么叫抗原,什么叫抗体;抗体在体内是如何产生的。PPY四川养殖网
抗原(Antigen)是一种物质(如细菌、病毒、血清等),能刺激机体的免疫系统引起一系列的免疫反应,产生抗体和各种淋巴因子,并能与相应的抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异的结合反应。PPY四川养殖网

抗体(Antihody)是在抗原刺激后,机体的免疫B淋巴细胞产生的免疫球蛋白,能与之相应的抗原产生特异的结合反应。PPY四川养殖网

抗蛇毒血清就是利用这一原理,以蛇毒作抗原,免疫动物在蛇毒的刺激下,发生一系列的免疫反应后产生免疫球蛋白——抗体,此抗体遇相应的蛇毒能特异性结合而使蛇毒失去毒性。抗原在体内产生抗体的过程分以下三个阶段。一是感应阶段,即识别抗原阶段,当颗粒抗原进入机体后,先由巨噬细胞吞噬处理,经巨噬细胞的各种酶类将颗粒抗原降解,使抗原决定簇与巨噬细胞的mRNA结合,然后将抗原信息传递给T细胞,T细胞再传递给B细胞,B细胞接受刺激产生抗体。二是反应阶段,B细胞在酶的作用下,分化成浆细胞,再分化成具有记忆功能的淋巴细胞和浆细胞,浆细胞可产生抗体。三是效应阶段,大量产生的淋巴因子和抗体、效应T细胞和各种抗体发生免疫特异反应的阶段,如杀伤靶细胞作用,即中和蛇毒,而细胞本身不受伤害。PPY四川养殖网

上述是抗体在体内产生的机理。有人提出,如果把蛇毒处理成抗原后,直接注射到人体里面,不就产生抗体不怕被毒蛇咬了吗?从理论上讲是完全可行的。但蛇毒成分复杂,分子量小,免疫抗原性差,要反复多次注射才能达到一定的抗体水平。若不定期反复注射,抗体也会下降,一旦被蛇咬伤,抗体正降至低峰,还是要注射抗蛇毒血清。但有一种情况,即从事和毒蛇打交道而经常被毒蛇咬伤者为数十次之多者,该伤者体内有可能具有较高的抗体水平,可以不注射抗蛇毒血清。不过该种伤者因多次被毒蛇咬伤,等于是致敏体质,若间隔较长时间后再次被同一种毒蛇咬伤,很可能产生休克反应。此非蛇毒中毒反应,而是抗原抗体复合物引起的过敏反应。此时应立即注射抗过敏药物抢救,如延误了,同样会造成生命危险。PPY四川养殖网

通过上述介绍,对抗蛇毒血清的制备就不难理解了。抗蛇毒血清的制备条件是蛇毒(抗原)、动物(免疫对象)和纯化设备。PPY四川养殖网

1.抗原PPY四川养殖网

选择健康毒蛇取毒,所取新鲜毒液经离心处理后冻干备用。干燥之蛇毒需测定毒力,选择毒性强,抗原谱广(经过免疫电泳检验)的蛇毒作抗原之用。作为抗原用的蛇毒使用前应除菌处理,因蛇毒中常混有致病的厌氧菌。由于蛇毒毒性强、分子量小、抗原性差,加大免疫剂量免疫动物易中毒死亡,所以要对蛇毒作减毒处理。通常采用甲醛法处理,使其毒性大部分失去而抗原性不变。PPY四川养殖网

2.动物PPY四川养殖网

免疫动物可用家兔、绵羊、马等。通常采用马是由于马的躯体大,采血量多。免疫用动物必须为经检疫合格的健康动物。PPY四川养殖网

3.免疫PPY四川养殖网

免疫剂量根据抗原性质而定,通常从小剂量开始,逐步增量。PPY四川养殖网

(1)基免(基础免疫)。开始第一针注射为基免,注射量很小,使免疫动物有个适应过程。有的再注射第二针。然后休息1~2个月。PPY四川养殖网

(2)超免。休息以后开始超免,即逐步加大剂量,每星期注射一针,一般连续5~6针后试血,当抗体达到一定水平后可采血。休息一星期后继续免疫,试血,再采血。PPY四川养殖网

(3)抗体纯化。免疫球蛋白纯化有多种,如盐析法、冷乙醇沉淀法、酸沉法、离子交换层析法、凝胶过滤法、电泳法等。我国采用硫酸铵盐析法,方便而经济,缺点是纯度稍差些。若要高纯度的抗体,常以几个方法结合在一起可达到满意效果。PPY四川养殖网

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